五、抗着丝点抗体的检测方法



五、抗着丝点抗体的检测方法

1.HEP-2细胞涂片的制备HEP-2细胞系人喉癌上皮细胞,在完全Eagle培养液中,37,二氧化碳孵育48~72h,使细胞生长达到一定数量,约1.2~1.5×106/ml,经胰酶消化后,可以传代或分装到置有玻片的培养皿中,继续用Eagle液培养及上述条件孵育,48h细胞不仅贴附于玻片上并已长成单细胞层。取出玻片用丙酮固定15min,自然干燥后待用,或保存于-20或4℃中。

表15-3 各种抗核抗体及临床意义

抗体名别名临床意义
抗Sm抗体SLE标记抗体,阳性率15~28%,常伴抗RNP抗体,有补体减少及肾受累
抗RNP抗体
抗U1-snRNP抗体抗MO抗体各种自身免疫病均可出现,单独高效价见于混合结缔组织病(MCTD)。
抗SS-B抗体抗La抗体干燥综合征的标记抗体(27%)
抗Ha抗体SLE 5%,同时抗SS-A阳性
抗SS-A抗体抗RO抗体干燥综合征为78%阳性,SLE49%系统性硬皮病23%
抗Scl-70抗体抗Og抗体系统性硬皮病的标记抗体44%
抗Scl-86抗体抗Scl-抗体阳性系统性硬皮病进行性。局部者阴性。
抗Ki抗体SLE特有12%阳性。
抗PCNA抗体抗Ne抗体SLE阳性1%。
抗JO-1抗体多发性肌炎的标记抗本(24%),阳性者多有肺病变
抗KO-1抗体多发性肌炎60%
抗PM-1抗体多见于系统性硬皮症(55%)
抗Ma抗体分类不明的胶原病
抗MOS抗体同上
抗RANA抗体抗SS-C抗体类风湿性关节 炎80%~90%
抗dsDNA抗体SLE所特有60%
抗ssDNA抗体见于各种胶原病

注:Sm(Smith);RNP:核糖核蛋白;Sn:为小核;SSB:干燥综合征B;SS-A:干燥综合征-A,Scl-70:硬皮病70,抗原分子量70000;PCNA:增殖细胞抗原;PM-1:多发性肌炎-;RANA:类风湿性关节 核抗原;dsDNA:双链DNA;ssDNA:单链DNA。

2.染色方法用间接免疫荧光法。

3.结果着丝点抗原是紧附于染色体着丝点的DNA蛋白质,当与相应抗体结合后荧光图型为约46个圆的荧光亮点。国际上多用HEP-2细胞,因这种细胞核大,分裂相旺盛,着丝点容易显露,这种抗体在进行性系统性硬化症(PSS)中阳性率可达31%~98%,是PSS的CREST型的标记抗体,CRESF是指具有软组织钙化,雷诺现象,食管功能低下,指端硬化,毛细血管扩张的PSS患者。

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